Techniki obserwacji w mikroskopii

Obserwacja Brightfielda jest najprostszą techniką mikroskopową. W tym systemie światło przechodzi przez próbkę lub odbija się od niej, bez żadnych zmian, poza tym spowodowanym przez samą próbkę.

Całe światło z próbki i otoczenia jest gromadzone przez soczewkę, aby utworzyć obraz na całkowicie jasnym tle. Ten rodzaj obserwacji jest najbardziej odpowiedni dla próbek zabarwionych lub pigmentów naturalnych, które są mocno skontrastowane.

Jest szeroko stosowany w patologii i histologii roślin i zwierząt, do obserwacji drobnych skrawków tkanek kontrastowa próbka pojawia się na jasnym tle. Nie jest to jednak zbyt przydatne do obserwacji żywych komórek.

Technika obserwacji ciemnego pola jest techniką kontrastową, bez bezpośredniego światła, w której do utworzenia obrazu wykorzystuje się jedynie światło ugięte od próbki.

W tej technice próbki muszą być przezroczyste i nie mogą się plamić. Próbka światła powinna być kontrolowana, aby światło centralne było zablokowane. Oświetlenie (dzięki kondensatorowi) tworzy wydrążony stożek, z jedynie ukośnym światłem, które odbija się na próbce i otoczeniu. Obraz jest tworzony za pomocą promieni świetlnych rozproszonych przez próbkę i scenę, które są rejestrowane przez cel.

Jest to odpowiednia technika do obserwacji żywych komórek i organizmów. Dzieje się tak, ponieważ kontrast tworzy jasny organizm na ciemnym tle, dlatego odsłaniamy tła, krawędzie i kontury organizmu. Jednym z głównych zastosowań jest hematologia na żywych komórkach krwi.

Technika kontrastu fazowego odpowiada również technice obserwacji kontrastu, niezależnie od redundancji. Oznacza to, że wynikiem obrazu będzie owoc przejścia światła przez próbkę, zwykle żywą, i wynikające z tego różne współczynniki załamania światła.

Światło z lampy / żarówki halogenowo-wolframowej jest kierowane przez soczewkę zbierającą i skupiane na specjalistycznych pierścieniach kondensatora. Czoła fal przechodzące przez pierścień oświetlają próbkę i przechodzą bezpośrednio (lub ugięte) przez próbkę i są opóźnione przez gradienty fazowe próbki. Niekierowane światło, ugięte i zebrane przez soczewkę, jest oddzielone płytką fazową i skupione na płaszczyźnie środkowej obrazu, aby utworzyć ostateczny obraz.

Technikę tę stosuje się do obserwacji żywych komórek lub do badania materiałów o bardzo cienkich arkuszach.

Mikroskop fluorescencyjny opiera się na oświetleniu obiektów promieniami o określonej długości fali. Obserwowany obraz jest wynikiem promieniowania elektromagnetycznego emitowanego przez cząsteczki, które pochłonęły promieniowanie pierwotne i ponownie emitowały światło o większej długości fali. To znaczy, byli podekscytowani. Aby przejść tylko pożądaną emisję wtórną, odpowiednie filtry muszą być umieszczone poniżej skraplacza i powyżej celu.

W ten sposób możemy określić tę technikę obserwacji jako pośrednią, ponieważ obserwacja lub wynik jest wynikiem reakcji niektórych cząsteczek lub komórek na pierwszy rodzaj światła lub promieniowania, które pochłonęły.

Mikroskopia fluorescencyjna służy do wykrywania niektórych substancji, takich jak witamina A lub substancje znakowane fluorochromem. Umożliwia także określenie rozmieszczenia jednego gatunku cząsteczki, jej ilości i lokalizacji w komórce. Jest to bardzo specyficzna i rozwinięta technika, ale jednocześnie szeroko stosowana w analizie biomolekularnej.